Polymerase-Kettenreaktion (PCR)

Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) ist eine weit verbreitete molekularbiologische Technik zur Amplifikation von DNA-Sequenzen. Bei PCR-Experimenten ist die Wasserqualität für verschiedene Schritte von entscheidender Bedeutung, einschließlich der Matrizenvorbereitung, der Herstellung von Primer- und Nukleotidlösungen sowie der PCR-Reaktion selbst. Hochreines Wasser ist unerlässlich, um Störungen bei der DNA-Amplifikation zu verhindern und den Erfolg von PCR-Experimenten sicherzustellen.

Was ist der Einfluss von Wasser bei der PCR?

Die Wasserqualität beeinflusst den Erfolg und die Zuverlässigkeit von PCR-Experimenten erheblich. Verunreinigtes Wasser kann zu Verunreinigungen in DNA-Proben führen, die Genauigkeit der DNA-Polymerasen beeinträchtigen und die Genauigkeit der DNA-Amplifikation beeinträchtigen. Hochreines Wasser ist erforderlich, um die Integrität der DNA-Templates aufrechtzuerhalten und zuverlässige PCR-Ergebnisse zu gewährleisten.
Welche Arten von Verunreinigungen im Wasser können die PCR beeinflussen?
Zu den Wasserverunreinigungen, die sich auf PCR-Experimente auswirken können, gehören:

Bakterien und Mikroorganismen

Auswirkung:
Eine bakterielle Kontamination kann die PCR-Ergebnisse beeinträchtigen.
Auswirkung:
Unbeabsichtigte Mikroorganismen können zu Variationen in den PCR-Proben führen, was zu Inkonsistenzen bei den Versuchsbedingungen führt und die Zuverlässigkeit von PCR-Analysen beeinträchtigt. Dies kann die Genauigkeit der DNA-Amplifikation beeinträchtigen.

Endotoxine

Auswirkung:
Endotoxine können die Effizienz von PCR-Reaktionen beeinflussen.
Auswirkung:
Bei PCR-Experimenten können Endotoxine den Amplifikationsprozess stören, was zu Schwankungen der Reaktionseffizienz führt und die Zuverlässigkeit der PCR-Ergebnisse beeinträchtigt. Dies kann die Genauigkeit der DNA-Amplifikation und -Quantifizierung beeinträchtigen.

Organische Verbindungen

Auswirkung:
Kleine organische Verbindungen in Wasser können bei PCR-Assays unerwünschte Signale auslösen.
Auswirkung:
Organische Verunreinigungen wie Huminsäuren und Pestizide können die Reinheit von PCR-Proben beeinträchtigen. Die Entfernung dieser organischen Verbindungen aus den PCR-Puffern ist entscheidend, um genaue und zuverlässige Amplifikationsergebnisse zu gewährleisten.

Ionische Verunreinigungen

Auswirkung:
Ionische Verunreinigungen können die PCR-Amplifikation stören.
Auswirkung:
Erhöhte Ionenwerte können die Spezifität und Effizienz von PCR-Reaktionen beeinflussen und zu Schwankungen der Amplifikationsergebnisse führen. Die Aufrechterhaltung niedriger Konzentrationen ionischer Kontaminanten ist für die Reproduzierbarkeit und Genauigkeit von PCR-Analysen unerlässlich.

Anforderungen an die Wassermessung für PCR

Bei PCR-Anwendungen hängt die Erzielung genauer und reproduzierbarer Ergebnisse von der Qualität des für die Analyse verwendeten Wassers ab. Die Auswahl des Wassers richtet sich nach der Empfindlichkeit der verwendeten PCR-Methoden. Für Techniken, die eine hohe Spezifität erfordern, wie z. B. die quantitative PCR (qPCR), wird die Verwendung von apyrogenem Reinstwasser vom Typ I dringend empfohlen.
Wasserqualitätsstandards gemäß Industrierichtlinien:

Resistivity (MΩ.cm)*

>18

TOC (ppb)

<10

Filter (μm)

<0.2

Bacteria (CFU/ml)

<1

Endotoxins (EU/ml)

<0.002

Nucleases

Not detected
Widerstand (mΩ.cm) *
Gesamtwert (ppb)
Filter (μm)
Bakterien (KBE/ml)
Endotoxine (EU/ml)
Nukleasen
>18
<10
<0,2
<1
<0,002
Nicht erkannt
Die Einhaltung dieser Wasserqualitätsstandards ist entscheidend für den Erfolg und die Genauigkeit von PCR-Experimenten. Wasser vom Typ I wird für kritische PCR-Anwendungen empfohlen, während Wasser vom Typ II für Routineexperimente geeignet sein kann.
ANMERKUNGEN:
Anwendungen, die eine Endotoxinfiltration erfordern, sollten einen CLF-5000-02E-Endfilter zur Endotoxinentfernung erwerben.

System

Etikett

Systemtiefe (Zoll)

Systemhöhe (Zoll)

Systembreite (Zoll)

Trockengewicht (lbs)

Einlassanschluss

Systemspannung

TOC-Überwachung

0,05μ-Ultrafiltration

Ultraviolette Oxidation

Reinheit des Abwassers

Abfließende Mikroorganismen

Abfließendes Natrium

Abfließendes Chlorid

Abwasser TOC

Maximaler Systemwert
Leistung (lpm)

Volumetrische Voreinstellungen

Montage

Anwendungen im Labor

Kategorie

System

Etikett

Systemtiefe (Zoll)

Systemhöhe (Zoll)

Systembreite (Zoll)

Trockengewicht (lbs)

Einlassanschluss

Systemspannung

TOC-Überwachung

0,05μ-Ultrafiltration

Ultraviolette Oxidation

Reinheit des Abwassers

Abfließende Mikroorganismen

Abfließendes Natrium

Abfließendes Chlorid

Abwasser TOC

Maximaler Systemwert
Leistung (lpm)

Volumetrische Voreinstellungen

Montage

Anwendungen im Labor

Kategorie

CLïR 3400 High Purity Lab Water System with 0.05 Micron Ultrafiltration and UV
10
25.25
21
32
⅜" O.D. Tubing
120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 10 CFU / ml
< 1ppb
< 1ppb
< 5 ppb
4
Countertop, Wall Mount
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry
CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Remote 120v)
14.4
21.6
14.7
42
⅜" O.D. Tubing
120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
< 1ppb
< 1ppb
< 1ppb
2
Wall Mount, Remote Dispense
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry
CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Remote 220v)
14.4
21.6
14.7
42
⅜" O.D. Tubing
220V/50Hz
> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
< 1ppb
< 1ppb
< 1ppb
2
Wall Mount, Remote Dispense
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry
CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Standard 120v)
14.4
21.6
14.7
42
⅜" O.D. Tubing
120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
< 1ppb
< 1ppb
< 1ppb
2
Countertop
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry

System

Etikett

Systemtiefe (Zoll)

Systemhöhe (Zoll)

Systembreite (Zoll)

Trockengewicht (lbs)

Einlassanschluss

Systemspannung

TOC-Überwachung

0,05μ-Ultrafiltration

Ultraviolette Oxidation

Reinheit des Abwassers

Abfließende Mikroorganismen

Abfließendes Natrium

Abfließendes Chlorid

Abwasser TOC

Maximaler Systemwert
Leistung (lpm)

Volumetrische Voreinstellungen

Montage

Anwendungen im Labor

Anwendungen im Labor

Kategorie

CLïR 3400 High Purity Lab Water System with 0.05 Micron Ultrafiltration and UV
10
25.25
21
32
⅜" O.D. Tubing
120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 10 CFU / ml
< 1ppb
< 1ppb
< 5 ppb
4
Countertop, Wall Mount
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry

System

Etikett

Systemtiefe (Zoll)

Systemhöhe (Zoll)

Systembreite (Zoll)

Trockengewicht (lbs)

Einlassanschluss

Systemspannung

TOC-Überwachung

0,05μ-Ultrafiltration

Ultraviolette Oxidation

Reinheit des Abwassers

Abfließende Mikroorganismen

Abfließendes Natrium

Abfließendes Chlorid

Abwasser TOC

Maximaler Systemwert
Leistung (lpm)

Volumetrische Voreinstellungen

Montage

Anwendungen im Labor

Anwendungen im Labor

Kategorie

CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Remote 120v)
14.4
21.6
14.7
42
⅜" O.D. Tubing
120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
< 1ppb
< 1ppb
< 1ppb
2
Wall Mount, Remote Dispense
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry

System

Etikett

Systemtiefe (Zoll)

Systemhöhe (Zoll)

Systembreite (Zoll)

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Systemspannung

TOC-Überwachung

0,05μ-Ultrafiltration

Ultraviolette Oxidation

Reinheit des Abwassers

Abfließende Mikroorganismen

Abfließendes Natrium

Abfließendes Chlorid

Abwasser TOC

Maximaler Systemwert
Leistung (lpm)

Volumetrische Voreinstellungen

Montage

Anwendungen im Labor

Anwendungen im Labor

Kategorie

CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Remote 220v)
14.4
21.6
14.7
42
⅜" O.D. Tubing
220V/50Hz
> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
< 1ppb
< 1ppb
< 1ppb
2
Wall Mount, Remote Dispense
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry

System

Etikett

Systemtiefe (Zoll)

Systemhöhe (Zoll)

Systembreite (Zoll)

Trockengewicht (lbs)

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Systemspannung

TOC-Überwachung

0,05μ-Ultrafiltration

Ultraviolette Oxidation

Reinheit des Abwassers

Abfließende Mikroorganismen

Abfließendes Natrium

Abfließendes Chlorid

Abwasser TOC

Maximaler Systemwert
Leistung (lpm)

Volumetrische Voreinstellungen

Montage

Anwendungen im Labor

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Kategorie

CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Standard 120v)
14.4
21.6
14.7
42
⅜" O.D. Tubing
120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
< 1ppb
< 1ppb
< 1ppb
2
Countertop
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry

System

Etikett

Systemtiefe (Zoll)

Systemhöhe (Zoll)

Systembreite (Zoll)

Trockengewicht (lbs)

Einlassanschluss

Systemspannung

TOC-Überwachung

0,05μ-Ultrafiltration

Ultraviolette Oxidation

Reinheit des Abwassers

Abfließende Mikroorganismen

Abfließendes Natrium

Abfließendes Chlorid

Abwasser TOC

Maximaler Systemwert
Leistung (lpm)

Volumetrische Voreinstellungen

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Anwendungen im Labor

Kategorie

CLïR 3400 High Purity Lab Water System with 0.05 Micron Ultrafiltration and UV
10
25.25
21
32
⅜" O.D. Tubing
120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 10 CFU / ml
< 1ppb
< 1ppb
< 5 ppb
4
Countertop, Wall Mount
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry
CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Remote 120v)
14.4
21.6
14.7
42
⅜" O.D. Tubing
120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
< 1ppb
< 1ppb
< 1ppb
2
Wall Mount, Remote Dispense
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry
CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Remote 220v)
14.4
21.6
14.7
42
⅜" O.D. Tubing
220V/50Hz
> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
< 1ppb
< 1ppb
< 1ppb
2
Wall Mount, Remote Dispense
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry
CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Standard 120v)
14.4
21.6
14.7
42
⅜" O.D. Tubing
120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
< 1ppb
< 1ppb
< 1ppb
2
Countertop
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry

Der Unterschied ist CLïR.